克倫特羅檢測試劑盒檢測原理
本試劑盒是利用競爭ELISA方法,在酶標板微孔上預包被抗克倫特羅抗原。檢測時,加入標準品或樣品溶液,克倫特羅抗體及酶標記物,包被抗原和加入樣本中的克倫特羅競爭性地與克倫特羅抗體結合后,再與酶標記物形成抗原抗體復合物,用TMB底物顯色;加入反應終止液,在450nm波長酶標儀下進行檢測,樣品中的克倫特羅濃度與吸收光強度成反比。
樣本處理前須知
處理任何樣本時,都須注意:
實驗中必須使用一次性吸頭,在吸取不同的試劑時要更換吸頭。
實驗之前須檢查各種實驗器具是否干凈,必須使用潔凈實驗器具,以避免污染干擾實驗結果。
注意事項
室溫低于20℃或試劑及樣本沒有回到室溫(20-25℃)會導致所有標準的OD值偏低。
在洗板過程中如果出現板孔干燥的情況,則會出現標準曲線不成線性,重復性不好的現象。所以洗板拍干后應立即進行下一步操作。
反應終止液為2M硫酸,避免接觸皮膚。如不慎滴漏到皮膚上,請盡快用水沖洗。
不要使用過了有效日期的試劑盒;也不要使用過了有效期的試劑盒中的任何試劑,摻雜使用過了有效期的試劑盒會引起靈敏度的降低;不要交換使用不同批號試劑盒中的試劑。
保存試劑盒于2-8℃,不要冷凍,將不用的微孔板放進自封袋重新密封。標準物質和無色的發色劑對光敏感,因此要避免直接暴露在光線下。
顯色試劑有任何顏色表明發色劑變質,應當棄之。0標準的吸光度(450nm)值小于0.5(A450nm<0.5 )時,表示試劑可能變質。
在加入底物液后,一般顯色15分鐘即可。若顏色較淺,可延長反應時間到20分鐘(或更長),但不得超過30分鐘。反之,則減短反應時間。
該試劑盒佳反應溫度為25℃,溫度過高或過低將導致檢測吸光度值和靈敏度發生變化。